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石蜡切片粘附载玻片的处理

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石蜡切片粘附载玻片的处理

发布日期:2015-05-13 00:00 来源:http://www.hmclyq.com 点击:

    石蜡切片粘附载玻片的处理

    1、载玻片的处理:

    抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的zli-9001 apes、zli-9003 histogriptm或zli-9005 poly-l-lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:elisa试剂盒

    1.1 apes:现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的apes中,停留20~30秒钟,取出稍停片刻,再入纯丙酮溶液或蒸馏水中涮去未结合的apes,置通风橱中晾干即可。用此载玻片捞片时应注意组织要一步到位,并尽量减少气泡的存在,以免影响染色结果。

    1.2 histogriptm:将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的histogrip液中,停留1~2分钟,然后用双蒸水快速清洗三次,室温干燥或60oc烤箱烘烤一小时,装盒备用。

    1.3 poly-l-lysine:将洗净、干燥的载玻片放入以1:10比例去离子水稀释的多聚赖氨酸溶液中,浸泡5分钟,60oc烤箱烘烤一小时或室温过夜干燥。装盒备用。试验中使用的器具均为非玻璃制品。elisa试剂盒

    2、常用酶消化:

    2.1 胰蛋白酶:一般使用浓度为0.05%~0.1%,消化时间为37℃、10~40分钟,主要用于细胞内抗原的显示。

    2.2 胃蛋白酶:一般使用浓度为0.4%,消化时间为37℃、30~180分钟,主要用于细胞间质抗原的显示,如:laminin(层粘蛋白),collagen iv(iv型胶原)等。

    2.3 皂素(saponin):一般使用浓度为2~10 g/ml的saponin溶液,消化时间为室温孵育30分钟。



粘附载玻片


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